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PRESENCIA DE TOXOPLASMA GONDII EN SUERO SANGUÍNEO
DE GANADO BOVINO EN EMPRESAS DE RASTRO
Ramónez, et al.
Reciena Vol.4 Núm.2 (2024): 6-10
MÉTODOS DE EXTRACCIÓN DE PIGMENTOS ANTOCIÁNICOS
DEL MAÍZ MORADO (ZEA MAYS L.)
Ramónez, et al.
Reciena Vol.4 Núm.2 (2024): 6-10
Las técnicas utilizadas con el ganado bovino se
ejecutaron de acuerdo con las normativas ecuatorianas
para la protección de animales, de acuerdo con la
legislación y los procedimientos de toma de muestras
2. MATERIALES Y MÉTODOS
La toxoplasmosis es una enfermedad zoonótica y
puede alcanzar una mortalidad del 10% en humanos
inmunocompetentes, distribuida en el mundo,
generando riesgos en las poblaciones humana y animal.
La enfermedad produce infecciones subclínicas
ocasionada por el parásito intracelular Toxoplasma
gondii [1, 2]. El Toxoplasma gondii tiene replicación
sexual o asexual dependiendo del hospedador [3]; en
los felinos como hospedador denitivo se desarrollan
por replicación sexual y en bovinos (Bos taurus)
y humanos como hospedador intermediario por
replicación asexual [4, 5].
El parásito que se trasmite a los seres humanos
es por consumo de carnes crudas o por malos
tratamientos de cocción recibidos, manteniendo los
quistes en los tejidos cárnicos consumidos, también
pueden trasmitirse por ingesta de agua y alimentos
contaminados por los ooquistes del mismo [2, 6]. La
replicación del Toxoplasma gondii en animales como el
ganado bovino puede causar abortos, linfoadenopatía,
ebre, inapetencia, patologías respiratorias y del
sistema nervioso, sobre todo en animales jóvenes [6, 7].
Al mismo tiempo, durante los controles de trasmisión
en el ganado bovino se han encontrado quistes del
parásito en el diafragma y en la membrana ocular,
así se muestra la contribución de los bovinos en la
transmisión [8].
Conocer la replicación y frecuencia del Toxoplasma en
animales bovinos es transcendental para prevenir la
posibilidad de abortos y mortalidad perinatal en esta
especie, se puede evitar que los bovinos infectados con
quistes tisulares sean sacricados para el consumo
humano en los centros de faenamiento animal [2,
6, 7]. La toxoplasmosis es una de las principales
enfermedades resultantes de una infección parasitaria
en los seres humanos, representa una preocupación de
gran magnitud a nivel mundial en términos de salud
pública, la cual es transmitida mediante el consumo
de alimentos [9, 10] Por lo tanto, analizar la frecuencia
de bovinos seropositivos a Toxoplasma gondii previo el
sacricio en centros de faenamiento autorizados en la
provincia del Azuay, fue el objetivo de este estudió.
1. INTRODUCCIÓN
aprobados por la Agencia de Regulación y Control
Fito y Zoosanitario Ecuatoriana (AGROCALIDAD) de
la República del Ecuador. La investigación se realizó
en tres centros ociales de faenamiento animal de la
Provincia del Azuay certicados por AGROCALIDAD
y ubicados en los cantones de Girón, Santiago de
Gualaceo y Paute.
Muestreo e identicación de anticuerpos
Las muestras de sangre del ganado bovino se tomaron
siguiendo la metodología modicada de Miller y
Fowler [11]. Se extrajo una muestra de sangre (10 mL)
de la vena coccígea a 148 animales sacricados por mes
en los mataderos. Las muestras fueron identicadas
y almacenadas en tubos vacutainer (SENNA
Cientíca, EUA) sin anticoagulante para su posterior
procesamiento.
Las muestras de sangre fueron centrifugadas a 10000 G
en una centrífuga (Dynac, Clay Adams, EUA) durante
15 min. Se extrajo 1 mL del suero y se almacenó en
tubos eppendorf (Citotest® Labware Manufacturing Co,
China) a –20 °C (Congelador Indurama, Ecuador), hasta
su procesamiento. Las muestras serológicas fueron
analizadas según la modicación de la metodología
de Györke et al. [12]. El kit comercial de ensayo ELISA-
indirecto para inmunoabsorción ligado a enzimas (ID
Screen® Toxoplasmosis Indirect Multi-species, IDVET®,
Montpellier, Francia) y el conjugado antimultiespecie
IgG-HRP, para detección de anticuerpos en suero
de animales rumiantes (sensibilidad y especicidad
diagnostica de 95% y 97%, respectivamente) fueron
utilizados en este estudio. En relación 2:400, se
diluyeron 10 µL del control negativo y positivo en 90
µL de diluyente y distribución con el suero sanguíneo,
la mezcla se incubó a 37 °C por 1 h en una estufa
de precisión universal (Digitronic-TFT, España).
A continuación, las placas fueron aclaradas por 3
ocasiones en 300 µL de con un medio de lavado. Así
mismo, en relación de 2:400 se preparó un conjugado
con peroxidasa agregando 100 µL de la dilución de
anticuerpo secundario multi-especie. Seguidamente, se
incubó las microplacas a 37 ºC por 1h, las placas fueron
aclaradas por 3 ocasiones con solución de lavado.
También, se agregó 100 µL de solución de revelado y
se incubó a 26 ºC por 15 min (Digitronic-TFT, España).
Posteriormente, a cada pocillo de la placa se agregó 100
µL de una solución de detención de la reacción para ser
analizadas en el lector de microplacas por absorbancia
Epoch, Biotek Microplate Spectrophotometer, EEUU.
Los análisis para la determinación del porcentaje de
presencia o ausencia (S/P: muestra/control positivo) de
las muestras de suero se realizaron por triplicado.